酶标分析仪检测三聚氰胺残留量的方法。用提取液将样品中三聚氰胺均质振荡提取。首先将三聚氰胺酶标记物、样品提取液和标准品加入涂有三聚氰胺抗体的微孔开始反应。在30分钟的孵育过程中，样品提取液中的三聚氰胺与三聚氰胺酶标记物竞争，与微孔中的三聚氰胺抗体结合。孵育30分钟后，微孔中所有未结合的三聚氰胺和三聚氰胺酶标记物都被冲洗掉。用去离子水洗涤后，在每孔中加入一种清晰的底物溶液，结合酶标分析仪标记将无色底物转化为蓝色物质。孵育30分钟后停止反应，根据各孔颜色深度读取数据。根据标准颜色，得到样品中三聚氰胺的浓度值。
一、酶标仪检测婴儿奶粉中三聚氰胺所需准备的材料：
1、蒸馏水或去离子水
2、可吸取50ul和100ul的移液器及吸头
3、4000转离心机
4、吸水纸或相当的吸水材料
5、450nm的酶标仪
6、计时器
7、20mM PBS：需自行配制
8、清洗液：需自行配制
二、酶标仪检测婴儿配方奶粉中三聚氰胺试剂配制：
1、20mM PBS： 0.62g NaH2PO4·2H2O+5.73g Na2HPO4·12H2O+9g NaCl，蒸馏水定容至1000ml
2、清 洗 液： 0.62g NaH2PO4·2H2O+5.73g Na2HPO4·12H2O+9g NaCl，蒸馏水定容至1000ml.+0.5ml 土温20
3、样品萃取液：称85g氯化钠定容到1L，摇匀，取出25ml加入25ml蒸馏水，再加入50ml **** 甲醇，摇匀
4、样品稀释液：0.31g磷酸二氢钠加上2.87g的磷酸氢二钠定容到1L，加入100ul吐温20，摇匀
三、酶标仪检测婴儿配方奶粉中三聚氰胺样品的前处理：
婴儿配方奶粉（稀释倍数：15）
1、称2g奶粉，加入6ml样品萃取液，混匀；
2、4000转离心5min；
3、取0.2ml上清液加入到0.8ml样品稀释液中稀释5倍；
4、取150ul测定；
四、酶标仪测定婴幼儿配方奶粉中三聚氰胺的步骤:
1. 将所有试剂和样品放回室温20-28℃，但时间不要超过24小时;
2. 从铝箔袋中取出所需数量的微孔条，固定在微孔板架上，将未使用的微孔条与干燥剂一起放入密封袋中存放;
3.用吸管将150ul标准品和样品吸入相应的微孔。确保每一种溶液都是用干净的吸管来绘制的，以避免交叉污染。加入每孔加入50ul三聚氰胺酶标记物;
4. 轻轻摇动盘子60秒，20-28摄氏度孵育30分钟;
5. 将微孔中的溶液倒入水槽中，将清洗液填满微孔，摇匀丢弃，重复三次，共四次清洗盘子;
6. 清洗一次后，将溶液倒进孔中，然后翻转微孔板，在吸水纸上轻拍干燥;
7. 每个微孔加入100ul底物溶液;
8. 20-28℃孵育30分钟;
9. 每个微孔加入100ul停止液;
10. 用酶标仪在450nm下读板
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