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酶标仪测量波长的设定以什么为标准?酶标仪和普通的光电比色的差异

作者:超级管理员    时间:2022-03-10 15:39:41    点击次数:1630
 

    实验中波长的选择主要依赖于你要测的样品。样品在不同的波长下,对光的吸收值也不同,但都有一个吸收峰,一般选择吸收峰时的波长进行实验。比如同样是MTT法做细胞毒性实验,就有使用490nm和570nm两种波长选择,如果使用了DMSO作为试剂,在溶解后呈紫(红)色,在490nm有*大吸收值;而对于SDS和酸化异丙醇,则选用570nm(655nm作为参考波长)。

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    酶标仪波长设定还要看你用的是什么酶标仪,如果是光栅式单色器(可以1nm步进调节),就可以直接设定吸收峰的波长;如果是滤光片式单色器,因为受滤光片波长限制,有时你就需要选接近使用波长的滤光片,比如655nm,你就可能选用650nm的滤光片。


    酶标仪和普通的光电比色计有以下几点差异:


乐发9    (1)盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板。微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,故用它作为固相载体。


乐发9    (2)由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光来都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。


    (3)酶标仪通常不仅用A,有时也使用光密度OD来表示吸光度。


乐发9    酶标仪可分为单通道和多通道2种类型,单通道又有自动和手动2种之分。自动型的仪器有X,Y方向的机械驱动机构,可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试,手动型则靠手工移动微孔板来进行测量。


    在单通道酶标仪的基础上又发展了多通道酶标仅,此类酶标仅一般都是自动化型的。它设有多个光束和多个光电检测器,如12个通道的仪器设有12条光束或12个光,12个检测器和12个放大器,在X方向的机械驱动装置的作用下,样品12个为一排被检测。多通道酶标仪的检测速度快,但其结构较复杂价格也较高。


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