酶标仪是酶联免疫吸附试验的仪器又称微孔板检测器。酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。
在酶标仪正式运行前,需要对其进行自检,下面我们来说说说其自检包括哪几方面。
(一)外观
酶标仪上应有仪器名称,型号,编号,生产厂家,出厂日期和电源电压;各调节旋钮,按键和开关均能正常工作,外表面无明显机械损伤;显示文字应清楚完整。
(二)酶标仪的稳定性(漂移)
乐发9 选用492nm波长,在吸光度o.0A处,测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行),记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测定值之差不应超过±0.00。
(三)吸光度测定的准确度
选用405,492和620nm波长,以空气为参比,分别测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测定3次,按下式计算准确度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:为标准值)。
(四)吸光度测定的重复性
乐发9 波长选择同(三),在酶标板*排加注空白溶液,第二排加入浓度为200rig/ml的重铬酸钾溶液,重复测定5次。记录每次测定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。
(五)酶标仪的线性
乐发9 选用540nm波长,将标称值o.5,1.0A中性滤光片分别放入测试板样本位置中,以空气为参比,各重复测定3次;然后将以上两片中性滤光片叠加后置于测试板的同一孔位中,重复测定3次。
(六)测定速度的检定
选用492nm波长,放人96孔酶标板进行测定,用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。酶标仪除了在选购时,应尽可能自检外,在使用中也应定期检定,以保证酶标仪测定的有效性。附:200ttg/ml重铬酸钾溶液的配制将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中(去盖)置于烘箱中,在105±5℃下烘2h后,置于干燥器内冷却30min,在分析天平上准确称取o.2829g,置于100ml烧杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解后,移入500ml容量瓶中,以少量o.05mol/L稀硫酸洗烧杯3次,洗液并入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀释至刻度线,摇匀。